ICS 65.020.30 B 44 中华人民共和国国家标准 GB/T 14926.46—2008 代替GB/T14926.46—2001 实验动物 钩端螺旋体检测方法 Laboratory animal-Method for examination of Leptospira spp. 2009-03-01实施 2008-12-03发布 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布 中国国家标准化管理委员会 中华人民共和国 国家标准 实验动物钩端螺旋体检测方法 GB/T14926.46—2008 * 中国标准出版社出版发行 北京复兴门外三里河北街16号 邮政编码：100045 网址 www.spc.net.cn 电话：6852394668517548 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷 各地新华书店经销 * 开本880X12301/16 印张0.5 字数9千字 2009年2月第一版 2009年2月第一次印刷 * 书号：155066·1-35767 如有印装差错 由本社发行中心调换 版权专有侵权必究 举报电话：（010)68533533 GB/T14926.46—2008 前言 GB/T14926《实验动物》共54个部分，为不同微生物和病毒检测技术方法。 本部分自实施之日起代替GB/T14926.46一2001《实验动物 钩端螺旋体检测方法》。 本部分与GB/T14926.46—2001相比主要技术差异如下： a） 原理部分增加显微镜凝集试验原理； b) 表1钩端螺旋体定量 显凝试验操作方法”更改为“钩端螺旋体定量显微镜凝集试验操作方法”： c) 修改原标准中所有关于酶联免疫吸附试验的内容； d）在原标准中增加了“7结果判定”。 本部分由全国实验动物标准化技术委员会提出并归口。 本部分由全国实验动物标准化技术委员会负责起草。 本部分主要起草人：范薇、田克恭、贺争鸣 本部分所代替标准历次版本发布情况为： -GB/T14926.46—2001。 1 52 GB/T14926.46—2008 实验动物 钩端螺旋体检测方法 1范围 本部分适用于犬钩端螺旋体的检测。 2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过GB/T14926的本部分的引用而成为本部分的条款。凡是注日期的引用文 件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本部分，然而，鼓励根据本部分达成 协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本 部分。 GB/T 14926.42 实验动物细菌学检测标本采集 GB/T14926.43 实验动物细菌学检测染色法、培养基和试剂 GB/T14926.50实验动物酶联免疫吸附试验 3原理 钩端螺旋体抗原与相应特异性抗体相遇，在适宜的电解质存在下发生凝集现象，此种凝集一般须用 暗视野显微镜检查。 钩端螺旋体抗原与待检血清中的特异性抗体结合，形成抗原抗体复合物。此抗原抗体复合物仍保 颜色反应的深浅与待检血清中所含有的特异性抗体的量成正比。 4主要设备和材料 4.1普通恒温培养箱。 4. 2 实体显微镜。 3恒温水浴箱。 4.3 4. 4 高速离心机。 4. 5 超声波细胞粉碎器。 4. 6 酶标仪。 4.7 5培养基及试剂 5.1犬型钩端螺旋体标准抗原。 5. 2 2标准阳性血清。 5.3标准阴性血清。 5.4生理盐水。 5.5显微镜凝集抗原：各群钩端螺旋体标准株接种Korthof培养基，28C培养5d～7d。取样作暗视 野显微镜检查，每400倍视野不少于50条，运动活泼并无自凝现象者，可作为抗原。 5.6ELISA抗原 5.6.1钩端螺旋体培养：各群钩端螺旋体标准株接种Korthof培养基，28℃培养5d～7d。 1